Effect van nicotinamide mononucleotide op hersenen mitochondriale respiratoire tekortkomingen bij een relevante ziekte van Alzheimer Murine Model-2

methoden

Dieren Alzheimer-relevante muizen Dubbele transgene muizen die een chimeer muis / menselijk amyloïde precursor-eiwit (APP) tot expressie brengen met de Zweedse mutatie (APPswe) en een mutant humaan preseniline 1 (PS1) met de delta E9 (PS1AE9) (stam # 005864) en wildtype C57BL / 6 muizen werden gekocht bij het Jackson Laboratory, (Bar Harbor, ME). AD-dieren positief voor de transgenen werden geïdentificeerd door polymerasekettingreactie (PCR) met behulp van genomisch DNA, geïsoleerd uit de staarten (Qiagen, Valencia, CA) en vervolgens verwerkt zoals eerder beschreven [14].

CaMKIIα-tTA en pTRE-mito / eYFP-muizen Transgene muizen die het tetracycline-gereguleerde transactivator-eiwit (tTA) tot expressie brengen onder regulerende controle van de calcium / calmodulin-afhankelijke kinase II (CaMKII) promoter [20] en dieren die pTRE-mito / eYFP tot expressie brengen [ 21] werden gekocht van het Jackson Laboratory.

Bigenische muizen die positief waren voor zowel CaMKIIα-tTA als pTRE-mito / eYFP (CaMK2a-mito / eYFP) werden gegenereerd door deze twee stammen te kruisen. Mannelijke en vrouwelijke bigenische muizen (2 maanden) werden in deze studie gebruikt. CaMK2amito / eYFP bigenische muizen werden geïdentificeerd door PCR zoals eerder beschreven [21]. De University of Maryland School of Medicine Institutional Animal Use and Care Committee keurde alle procedures met betrekking tot dierenverzorging, euthanasie en weefselafname goed.

Nicotinamide mononucleotide (NMN) toediening APP (swe) / PS1 (ΔE9) en CaMK2a-mito / eYFP mannelijke en vrouwelijke muizen (2 maanden) kregen NMN (100 mg / kg, Sigma N3501) subcutaan (steriel PBS (200 ul)) toegediend in de losse huid rond de nek en schouder) om de andere dag gedurende 28 dagen. niet-transgene   (NTG) en vehikelcontroledieren werden gedurende 28 dagen om de andere dag 200 ul steriele PBS toegediend om de dag. Subcutane toediening werd gebruikt op basis van pilotstudies. Er werden geen significante verschillen in gewicht of externe kenmerken (furcondition, energie, grootte enz.) Waargenomen tussen NMN en met vehikel behandelde muizen (gegevens niet getoond).