Effect van nicotinamide mononucleotide op hersenen mitochondriale respiratoire tekortkomingen bij een relevante ziekte van Alzheimer Murine Model-7

Morfologische analyses van mitochondriën in de hersenen van CaMK2a-mito / eYFP-muizen

Om mogelijke verklaringen voor de verbetering van de voordelen na in vivo toevoeging van de NAD + precursor NMN te onderzoeken, onderzochten we morfologische parameters in hersenweefsel van muizen (3 maanden) met op mitochondriën gerichte fluorescerende eiwitten in neuronen (CaMK2a-mito / eYFP-muizen). Van mitochondriale morfologie is aangetoond dat het de ademhalingssnelheid, calciumhomeostase en organeltransport beïnvloedt [15,16]. De mitochondriale ademhalingssnelheden van hersenen bij CaMK2amito / eYFP-muizen zijn eerder vastgesteld als vergelijkbaar met de snelheden bij wildtype muizen [21] en kunnen daarom worden gebruikt als een belangrijk hulpmiddel om morfologie te onderzoeken.

Volgens hetzelfde protocol voor NMN-behandeling als beschreven in de AD-dieren hierboven, hadden CaMK2a-mito / eYFP-muizen gegeven vehikel meer gefragmenteerde neuronale mitochondriën in het CA1-gebied van de hippocampus in vergelijking met CaMK2a-mito / eYFP-dieren die NMN kregen (Figuur 6A) . De aan NMN gegeven CaMK2a-mito / eYFP-muizen hadden veel minder gefragmenteerde mitochondriën, maar hadden langere neuronale mitochondriën in het CA1-gebied (Figuur 6B).

We onderzochten vervolgens de vorm van fluorescerende neuronale mitochondriën in de CaMK2a-mito / eYFP-muizen. Vormfactor is een numerieke waarde die aangeeft hoe vergelijkbaar een 3D-vorm is met een perfecte bol. Aldus werd een vormfactorwaarde van 1 als volledig sferisch beschouwd, terwijl de dichter bij nul als staafvormig werd beschouwd. Figuur 6C geeft de relatieve tellingen weer die de vormfactorwaarde van neuronale mitochondriën van met NMN behandelde versus met drager behandelde muizen omvatten. Toen de vorm van neuronale mitochondriën in het CA1-hippocampale gebied werd onderzocht, was er een significante (p <0,05) toename="" van="" staafvormige="" mitochondriën="" bij="" met="" nmn="" behandelde="" muizen="" in="" vergelijking="" met="" met="" vehikel="" behandelde="">

(Figuur 6D). Er was een wederzijdse afname van bolvormige mitochondriën in dezelfde gebieden in met NMN behandelde muizen in vergelijking met met drager behandelde dieren die significant (p <0,05) waren="" veranderd="" (figuur=""> Interessant is dat er een significant (p <0,05) verschil="" was=""> staaf en bolvormige mitochondria in de met voertuigen behandelde muizen maar geen significant vormverschil in de met NMN behandelde dieren (Figuur 6D). Na kwantificering van fluorescerende neuronale mitochondriën in de CA1 hippocampale gebieden, was er een significant verschil in mitochondriale skeletlengte bij het vergelijken van met NMN behandelde en met drager behandelde CaMK2a-mito / eYFP-muizen (Figuur 6E, F). De relatieve tellingen voor skeletlengte werden onderverdeeld in "bolvormig" (0-2 μm), "staafvormig" (2.2 - 6 μm) en "buisvormig" (6.2-15 μm). De controlemuizen hadden een significante (p <0,05) verhoogde="" mitochondriën="" met="" een="" "sferische"="" lengte="" in="" vergelijking="" met="" de="" met="" nmn="" behandelde="" dieren="" (figuur=""> Omgekeerd hadden de controlemuizen de mitochondriën in de vorm van "staafvormige" (p <0,01) en="" "buisvormige"="" (p=""><0,001) lengte="" significant="" vergeleken="" met="" met=""> behandelde dieren (Figuur 6F). Er waren geen significante verschillen in de relatieve tellingen voor totaal volume of totale oppervlakte tussen behandelingsgroepen (gegevens niet getoond). Verder benaderde het totale aantal mitochondriën het belang met een trend naar minder mitochondriën bij met NMN behandelde muizen (p = 0,066), vergeleken met met vehikel behandelde dieren (gegevens niet getoond). Samen suggereren deze gegevens dat NMN-behandeling leidt tot langere mitochondriën in het onderzochte hippocampale deelgebied, waarschijnlijk door verhoogde fusie en / of verminderde splijting.

gihi-nmn-1